Anar al contingut

Prova de la gota (liquen)

De L'Enciclopèdia, la wikipedia en valencià

La prova de la gota en liquenología és un anàlisis puntual que s'usa per a ajudar a identificar líquenes. Es realisa colocant una gota d'un reactiu químic en diferents parts del liquen i observant el canvi de color (o la falta del mateix) associat en l'aplicació del químic. Les proves es troben rutinariamente en claus dicotòmiques per a espècies de líquenes, i aprofiten l'àmplia gama de productes de líquenes (metabòlits secundaris) produïts pels líquenes i la seua singularitat entre els tàxons. Com a tal, les proves puntuals revelen la presència o absència de substàncies químiques en vàries parts d'un liquen. Varen ser proposts per primera volta com un método per a ajudar a identificar espècies pel liquenólogo finlandés William Nylander en 1866.[1]

Tres proves puntuals comunes usen una solució acuosa de KOH al 10% (prova K), una solució acuosa saturada de pols blanquejadora o hipoclorito de calcio (prova C) o una solució alcohòlica de p-fenilendiamina al 5% (prova P). Els canvis de color es produïxen per la presència de metabòlits secundaris particulars en el liquen. En la lliteratura de referència clau d'identificació, el resultat de les proves químiques puntuals servix com a característica principal per a determinar les espècies de líquenes. Hi ha vàries atres proves puntuals d'us menys freqüent i d'us més llimitat que s'ampren en situacions específiques, com per a distinguir entre certes espècies. Les variacions de la tècnica, inclós l'us de paper de filtre per a millorar la visibilitat de les reaccions o l'examen al microscopi, s'adapten a diferents tipos de líquenes i pigmentació, i els resultats generalment es resumixen en un còdic curt que indica la substància i la reacció observades. Atres métodos de diagnòstic, com l'exposició a la llum ultravioleta (UV), poden ajudar a identificar els metabòlits del liquen i distinguir entre espècies, ya que algunes substàncies emeten fluorescència baix els rajos UV, lo que ajuda a diferenciar espècies estretament relacionades.[2]

Proves

[editar | editar còdic]
Proves puntuals en el liquen folioso Punctelia borreri mostrant tale (dalt) i mèdula (avall). El canvi de color roig rosat de la mèdula en les proves C i KC indica la presència d'àcit girofórico, una característica química que ajuda a distinguir-ho d'espècies similars en el mateix gènero.

Són quatre les proves de la gota que s'usen en major freqüència per a ajudar en l'identificació de líquenes.[3]

Prova k

[editar | editar còdic]

El reactiu para la prova K és una solució acuosa d'hidròxit de potassi (KOH) (10-25%) o, en absència de KOH, una solució acuosa al 10% d'hidròxit de sodi (NaOH, lleixiu), que proporciona resultats casi idèntics.[4] Una solució al 10% de KOH conservarà la seua efectivitat durant aproximadament 6 mesos a un any.[5] La prova depén de la formació de sal i requerix la presència d'a lo manco un grup funcional àcit en la molècula. Els composts de liquen que contenen una quinona com a part de la seua estructura produiran un color roig obscur a violeta. Els composts d'eixemple inclouen els pigments que són antraquinonas, naftoquinonas i terfenilquinonas. Els colors groc a roig es produïxen en la prova K i alguns depsides (inclosos atranorina i àcit tamnólico), i moltes β-orcinol depsidonas. Pel contrari, les xantonas, els derivats del àcit pulvínico i l'àcit úsnico no tenen cap reacció.[4]

Alguns líquenes comuns i àmpliament distribuïts que tenen productes de liquen en una reacció positiva a K inclouen Xanthoria parietina, que és K+ (roig púrpura) per la parietina (una antraquinona), i Dibaeis baeomyces, que és K + (groc) pel compost didépsido àcit baeomicésico.[6]

Prova c

[editar | editar còdic]

Esta prova usa una solució saturada d'hipoclorito de calcio (pols blanquejadora) o, alternativament, una solució diluïda (generalment s'usa 5.25%) d'hipoclorito de sodi o lleixiu domèstic sense diluir. Estes solucions generalment es reemplacen diàriament, ya que es descomponen en 24-48 hores; es descomponen encara més ràpidament quan s'exponen a la llum solar (menys d'una hora) i, per lo tant, es recomana guardar-les en una botella de color obscur. Atres factors que acceleren la descomposició d'estes solucions són la calor, la humitat i el diòxit de carbono.[7]

Els colors típicament observats en la prova C són roig i taronja-rosa. Els productes químics que causen una reacció roja inclouen àcit anziaico, eritrina i àcit lecanórico, mentres que els que produïxen un roig anaranjado inclouen àcit girofórico.[8] En rares ocasions, es produïx un color vert esmeralda, causat per la reacció en dihidroxidibenzofuranos,[9]com la estrepsilina química.[8] Un atre color rar produït per esta prova és el groc, que s'observa en Cladonia portentosa com a resultat de l'àcit úsnico dibenzofurano.[10]

Alguns líquenes comuns i àmpliament distribuïts que tenen productes de líquenes en una reacció positiva a C inclouen Lecanora expallens, que és C+ (taronja) per l'àcit xantona tiofánico, i Diploschistes muscorum, que és C+ (roig) per l'àcit diploschistésico didépside.[10]

Prova de DP

[editar | editar còdic]
p-fenilendiamina.

Açò també es coneix com la prova P. Utilisa una solució etanólica de parafenilendiamina (PD) a l'1-5%, elaborada colocant una gota d'etanol (70-95%) sobre uns pocs cristals del químic; açò produïx una solució inestable i sensible a la llum que dura aproximadament un dia.[10] Una forma alternativa d'esta solució, cridada solució de Steiner, és molt més duradora, encara que produïx reaccions de color menys intenses. Per lo general, es prepara dissolent 1 gram de PD, 10 grams de sulfito de sodi i 0,5 milílitros de detergent en 100 milílitros d'aigua; inicialment de color rosat, la solució es torna púrpura en l'edat. La solució de Steiner durarà mesos.[5] La fenilendiamina reacciona en aldehits per a produir bases de Schiff d'acort en la següent reacció:[9]

R−CHO + H2N−C6H4−NH2 → R−CH=N−C6H4−NH2 + H2O

Els productes d'esta reacció són de color groc a roig. La majoria de les depsidonas de β-orcinol i alguns depsidos de β-orcinol reaccionaran positivament.[11] La prova PD, coneguda per la seua alta especificidad cap a les substàncies que produïxen reacciones K+ grogues o roges, ha reemplaçat en gran mida a la prova K més simple pero menys concloent.[12] La DP és venenosa tant en pols com en solució, i les superfícies que entren en contacte en ella (inclosa la pell) es decolorarán.[13]

Alguns líquenes comuns i àmpliament distribuïts que tenen productes de líquenes en una reacció positiva a P inclouen Parmelia subrudecta, que és PD+ (groga) per la atranorina dépsido, i Hypogymnia physodes, que és PD + (taronja) pel àcit fisodálico depsidona.[14]

Prova de KC

[editar | editar còdic]

Esta prova es pot realisar humint el tale en K seguit immediatament per C. L'aplicació inicial de K descompon (per mig d'hidrólisis) els enllaços éster en els depsidos i depsidonas. Si es llibera un grup hidroxilo fenòlic que és meta a un atre hidroxilo, llavors es produïx un color roig a taronja a mida que s'aplica C.[15] l'àcit alectorónico i l'àcit fisódico produïxen este color, mentres que es produïx un color violeta quan està present l'àcit picrolicénico. La prova CK és una variació menys utilisada que invertix l'orde d'aplicació dels productes químics. S'usa en casos especials quan s'analisa el color taronja produït pel àcit barbático o l'àcit difractaico, com està present en Cladonia floerkeana.[8] El yodo de Lugol és un atre reactiu que pot ser útil per a identificar certes espècies.[16]

Hipogimnia tubulosa és un liquen que és KC+ (taronja-rosa) per l'àcit fisódico depsidona; Cetrelia olivetorum és KC+ (rosa-roig) per l'àcit depsidona alectorónico.[10]

Proves menys comunes

[editar | editar còdic]

Hi ha vàries proves de la gota que s'usen en poca freqüència per la seua aplicabilidad llimitada, pero poden ser útils en situacions en les que és necessari detectar metabòlits particulars de liquen o distinguir entre certes espècies quan atres proves són negatives.

  • Una solució al 10% d'hidròxit de bari (Ba(OH)2) dona un color violeta quan es prova en àcit diploesquistésico, un químic que es troba en algunes espècies de Diploesquistes.
  • Una solució saturada de peròxit de bari (BaO2), quan es prova en àcit olivetórico, es tornarà d'un color groc que es tornarà vert despuix d'uns minuts.
  • Una solució al 1% (pes per volum) de clorur fèrric (FeCl3) en etanol produïx varis colors possibles quan es prova en composts que tenen grups fenòlics.[17]
  • La prova de N usa una solució al 35% d'àcit nítric, que es pot usar per a distinguir espècies de Melanelia d'espècies marrons de Xantoparmelia.[5]
  • La prova S utilisa una solució d'àcit sulfúric (0,5% a 10%) aplicada en brocha sobre una mostra seca extreta en acetona d'un liquen tale, seguit de calfament a la flama durant 30 segons o fins que es desenrolle el color. Un color violeta persistent a rosa lluenta indica la presència d'àcit miríquídico i pot usar-se per a distinguir entre els dos líquenes de neu morfològicament similars, Stereocaulon alpinum i S. groenlandicum, sense tindre que recórrer a anàlisis químics més laboriosos.[18]
  • La prova de Beilstein implica calfar una menuda mostra de la substància a analisar en un aram de coure; els composts halogenados causen un color de flama verda intens temporal.[18]
  • Un reactiu d'anisaldehído, quan es calfa en extractes d'acetona, produïx un color magenta en àcit úsnico, encara que els àcit meroclorofaéicos també donen una reacció roja similar.[19]

Realisació de les proves de la gota

[editar | editar còdic]
Proves químiques puntuals en liquen crustoso i saxícola Aspicilia epiglypta.

Les proves de la gota es realisen per mig de la colocació d'una menuda cantitat de reactiu desijat en la part dels líquenes a ser provat. A sovint, tant en la corfa i la mèdula dels líquenes són provats, i, a voltes, és útil per a provar atres estructures tals com el soredio. És un método per a extraure una menuda cantitat de la substància química en un tubo capilar de vidre i toca el liquen tale; un chicotet pinzell també és utilisada per a este propòsit. Les reaccions poden visualisar-se millor en una lupa o un microscopi estéreo.[8] Un full d'afaitar es pot utilisar per a llevar la corfa i l'accés a la mèdula. Alternativament, la solució pot ser aplicada a liquen característiques que carixen d'una corfa o que ixen de la mèdula exposta, tals com soredio, pseudocyphellae, o la part inferior de les escamas.[20]

En una variació d'esta tècnica, sugerida pel químic suec Johan Santesson, [21] s'usa un tros de paper de filtre per a tractar de fer que la reacció del color siga més fàcilment observable. El fragment de liquen es pressiona sobre el paper i les substàncies líquenas s'extrauen en 10-20 gotes d'acetona. Despuix d'evaporar l'acetona, les substàncies líquenas es deixen en el paper en un anell al voltant del fragment de liquen. El paper de filtre pot llavors sometre's a prova puntual de la manera habitual.[22] En els casos en que els resultats d'una prova puntual en el tale són incerts, és possible esclafar una secció prima del teixit en un portaobjetos de microscopi en una cantitat mínima d'aigua i reactiu baix d'un cubreobjetos. Un canvi de color és visible baix un objectiu de microscopi de baixa potència, o quan el portaobjetos es coloca sobre un fondo blanc.[8] Esta tècnica és útil quan s'analisen líquenes en pigments obscurs, com Bryoria.[5]

Les proves puntuals es poden usar individualment o en combinació. Els resultats d'una prova puntual generalment es representen en un còdic curt que inclou, en orde, (1) una lletra que indica el reactiu utilisat, (2) un signe " + " o " − " que indica un canvi de color o falta de canvi de color, respectivament, i (3) una lletra o paraula que indica el color observat. Ademés, es deu anar en conte d'indicar qué part del liquen es va analisar. Per eixemple, "Corfa K + taronja, C -, P -" significa que la corfa de la mostra de prova es va tornar taronja en l'aplicació de KOH i no va canviar en lleixiu o parafenilendiamina. De manera similar, "Mèdula K -, KC + R" indicaria que la mèdula del liquen era insensible a l'aplicació de KOH, pero l'aplicació de KOH seguida immediatament de lleixiu va fer que la mèdula es tornara roja.[12]


Ocasionalment, pren algun temps per a que es desenrolle la reacció del color. Per eixemple, en certes espècies de Cladonia, la reacció de PD en àcit fumarprotocetrárico pot tardar fins a mig minut.[13] Pel contrari, les reaccions en C i KC solen ser fugaces i ocorren un segon despuix d'aplicar el reactiu, per lo que és fàcil passar per alt un canvi de color. Hi ha vàries raons possibles per les que no es produïx un resultat anticipat de la prova. Les causes inclouen reactius vells i químicament inactius, i baixes concentracions de substàncies líquenas en la mostra. Si el color del tale és obscur, es pot enfosquir un canvi de color i atres tècniques són més apropiades, com la tècnica del paper de filtre.[8]


Referències

[editar | editar còdic]
  1. ↑ Journal of the Linnean Society of London, Botany.doi:10.1111/j.1095-8339.1866.tb01301.x.
  2. ↑ Botanica Helvetica.113
    49–61.doi:10.1007/s00035-003-0674-z.Consultat el 2026-07-16.
  3. ↑ Corvallis: Oregon State University Press..
  4. ↑ 4,0 4,1 New York: Academic Press.
  5. ↑ 5,0 5,1 5,2 5,3 New Haven: Yale University Press.
  6. ↑ British Lichen Society.
  7. ↑ New York: Academic Press.
  8. ↑ 8,0 8,1 8,2 8,3 8,4 «BLS Publications | The British Lichen Society». britishlichensociety.org.uk. Consultat el 2026-07-16.
  9. ↑ 9,0 9,1 Recent Advances in Lichenology. New Delhi: Springer Índia.doi:10.1007/978-81-322-2181-4_11.
  10. ↑ 10,0 10,1 British Lichen Society.
  11. ↑ New York: Academic Press.
  12. ↑ 12,0 12,1 London: Edward Arnold.
  13. ↑ 13,0 13,1 Universitetsforlaget.
  14. ↑ British Lichen Society..
  15. ↑ New York: Academic Press.
  16. ↑ New Haven, Conn. [o.a.]: Yale University Press.
  17. ↑ British Lichen Society.
  18. ↑ 18,0 18,1 The Lichenologist..doi:10.1017/s0024282913000418.
  19. ↑ The Lichenologist..doi:10.1017/S002428292400015X.
  20. ↑ Universitetsforlaget.
  21. ↑ Acta Chemica Scandinavica..doi:10.3891/acta.chem.scand.21-1162.
  22. ↑ New York: Academic Press.
Obtingut de «https://www.lenciclopedia.org/w/index.php?title=Prova_de_la_gota_(liquen)&oldid=809730»