Proves de detecció d'antígenos de la malaria

Les proves de detecció d'antígenos de la malaria són un grup de proves de diagnòstic ràpit disponibles en el mercat, del tipo de prova ràpida d'antígenos, que permeten el diagnòstic ràpit del paludisme, o malaria per part de persones que no estan capacitades en les tècniques de laboratori tradicionals per al diagnòstic d'esta malaltia o en situacions en les que no es dispon de dit equip. Actualment hi ha més de 20 proves d'este tipo disponibles en el mercat (WHO product testing 2008). El primer antígeno de la malaria adequat com a objectiu per a una prova d'este tipo va ser una enzima glicolítica soluble, la glutamato deshidrogenasa.[1][2][3] En l'actualitat, cap de les proves ràpides és tan sensible com una película de sanc grossa, ni tan barata. Un inconvenient important en l'us de tots els métodos actuals de tira reactiva és que el resultat és essencialment qualitatiu. No obstant, en moltes zones endèmiques d'Àfrica tropical, l'evaluació quantitativa de la parasitemia és important, ya que un gran percentage de la població donarà positiu en qualsevol ensaig qualitatiu.

Diagrama esquemàtic d'una tira reactiva

Proves de diagnòstic ràpit del paludisme basades en antígenos

El paludisme és una malaltia curable si els pacients tenen accés a un diagnòstic primerenc i a un tractament ràpit. Les proves de diagnòstic ràpit basades en antígenos tenen un paper important en la perifèria de la capacitat dels servicis de salut, ya que moltes clíniques rurals no tenen la capacitat de diagnosticar el paludisme in situ per la falta de microscopis i tècnics capacitats per a evaluar les extensions de sanc. Ademés, en les regions a on la malaltia no és endèmica, els tècnics de laboratori tenen molt poca experiència en la detecció i identificació dels paràsits de la malaria. Un número cada volta major de viagers procedents de zones templades visita cada any els països tropicals i molts d'ells retornen en una infecció de paludisme. Les proves RDT seguixen considerant-se un complement de la microscopía convencional, encara que en algunes millores podrien substituir-la. Les proves són senzilles i el procediment pot realisar-se in situ en condicions de camp. Estes proves utilisen una mostra obtinguda per mig de punción digital o sanc venosa, la prova completa tarda entre 15 i 20 minuts i no requerix laboratori. El llindar de detecció d'estes proves de diagnòstic ràpit és de l'orde de 100 paràsits/µl de sanc, front als 5 paràsits/µl que pot detectar la microscopía de capa grossa.[4][5][6]

pGluDH

El glutamato deshidrogenasa de Plasmodium (pGluDH) és una enzima que no es troba en els glòbuls rojos de l'hoste, i és precipitada per anticossos de l'hoste Esta tècnica oferix un diagnòstic precís, en vista de la creixent resistència del Plasmodium falciparum i de l'elevat preu de les alternatives a la cloroquina. i va ser recomanada com a enzima marcadora de les espècies de Plasmodium per Picard-Maureau et al. en 1975. La prova de l'enzima marcadora de la malaria és adequada per al treball de rutina i és ara una prova estàndar en la majoria dels departaments que s'ocupen de la malaria. Se sap que la presència de pGluDH representa la viabilitat del paràsit i una prova de diagnòstic ràpit que utilise pGluDH com antígeno tindria la capacitat de diferenciar els organismes vius dels morts. En China s'ha desenrollat una prova de diagnòstic ràpit completa en la pGluDH com antígeno, i ara està en fase de proves clíniques. Les GluDH són enzimes ubiqües que ocupen un important punt de ramificació entre el metabolisme del carbono i del nitrogen. Tant les enzimes GluDH depenents de nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) [EC 1.4.1.2] com les depenents de nicotinamida adenina dinucleótido fosfat (NADP) [EC 1.4.1.4] estan presents en Plasmodia; la GluDH depenent de NAD és relativament inestable i no és útil per a fins de diagnòstic. La glutamato deshidrogenasa proporciona una font de carbono oxidable utilisada per a la producció d'energia, aixina com un portador d'electrons reduït, el NADH. El glutamato és el principal donant d'aminoàcits en les reaccions de transaminación posteriors. Les múltiples funcions del glutamato en l'equilibri del nitrogen ho convertixen en una porta d'entrada entre l'amoníac lliure i els grups amino de la majoria dels aminoàcits. S'ha publicat la seua estructura cristalina. Mai s'ha comprovat l'activitat de la GluDH en P. vivax, P. ovale i P. malariae, pero donada l'importància de la GluDH com a enzima de punt de ramificació, cada cèlula deu tindre una alta concentració de GluDH. És ben sabut que les enzimes en un alt pes molecular (com la GluDH) tenen moltes isozimas, lo que permet diferenciar els ceps (donat l'anticòs monoclonal adequat). L'hoste produïx anticossos contra l'enzima parasitaria que indiquen una baixa identitat de seqüència.

Proteïna rica en histidina II

La proteïna rica en histidina II (HRP II) és una proteïna hidrosoluble rica en histidina i alanina, que es localisa en varis compartiment celulars, inclós la citoplasma del paràsit. El antígeno s'expressa únicament en els trofozoitos de P. falciparum. La HRP II de P. falciparum ha segut implicada en la biocristalisació de la hemozoína, una forma inerte i cristalina de ferriprotoporfirina IX (Fe(3+)-PPIX) produïda pel paràsit. El paràsit segrega una cantitat considerable de la HRP II en el torrent sanguíneu de l'hoste i el antígeno pot detectar-se en els eritrocits, el sèrum, el plasma, el líquit cefalorraquídeo i inclús l'orina com a proteïna hidrosoluble segregada. Estos antígenos persistixen en la sanc circulant en acabant de que la parasitemia haja desaparegut o s'haja reduït considerablement. Per lo general, les proves basades en la HRP2 tarden al voltant de dos semanes despuix d'un tractament exitós en ser negatives, pero poden tardar fins a un més, lo que compromet el seu valor en la detecció de l'infecció activa. S'han notificat falsos resultats positius de la vareta de medició en pacients en artritis reumatoide positiva al factor reumatoide. Ya que la HRP-2 només és expressada per P. falciparum, estes proves donaran resultats negatius en mostres que només continguen P. vivax, P. ovale o P. malariae; per lo tant, molts casos de paludisme no falciparum poden ser diagnosticats erròneament com a negatius (alguns ceps de P. falciparum tampoc tenen HRP II). La variabilitat dels resultats de les RDTs basades en pHRP2 està relacionada en la variabilitat de l'antígeno diana.

pLDH

La lactato deshidrogenasa de P. falciparum (PfLDH) és una oxidorreductasa de 33 kDa [EC 1.1.1.27]. És l'última enzima de la via glicolítica, essencial per a la generació d'ATP i una de les enzimes més abundants expressades per P. falciparum. La LDH de Plasmodium (pLDH) de P. vivax, P. malariae i P. ovale) presenta un 90-92% d'identitat en la PfLDH de P. falciparum. S'ha observat que els nivells de pLDH es reduïxen en la sanc abans que la HRP2 despuix del tractament. En este sentit, la pLDH és similar a la pGluDH. No obstant, les propietats cinètiques i la sensibilitat als inhibidors dirigits al lloc d'unió del cofactor diferixen significativament i són identificables per mig de la medició de les constants de dissociació per als inhibidors que, diferixen fins a en 21 voltes.[7]

pAldo

La fructosa-bisfosfato aldolasa [EC 4.1.2.13] cataliza una reacció clau en la glucólisis i la producció d'energia i és produïda per les quatre espècies. La aldolasa de P. falciparum és una proteïna de 41 kDa i té una similitut de seqüència del 61-68% en les aldolasas eucariota conegudes. S'ha publicat la seua estructura cristalina. La presència d'anticossos contra la p41 en el sèrum d'adults humans parcialment immunes a la malaria sugerix que la p41 està implicada en la resposta inmunitario protectora contra el paràsit.

Vore també

Referències

  1. ↑ “Antibodies to the glutamate dehydrogenase of Plasmodium falciparum” (1986). Parasitology 92 (2): 313–324. doi:10.1017/S0031182000064088. PMID 3086819.
  2. ↑ “Characterization of Plasmodium falciparum glutamate dehydrogenase-soluble antigen” (1998). Braz J Med Biol Res 31 (9): 1149–1155. PMID 9876282.
  3. ↑ “Preparation of a monoclonal antibodies against Plasmodium falciparum glutamate dehydrogenase and establishment of colloidal gold-immunochromatographic assay” (2005). Vaig donar Yi Jun Yi dona Xue Xue Bao = Academic Journal of the First Medical College of PLA 25 (4): 435–438. PMID 15837649.
  4. ↑ «Roll Back Malaria Partnership: Rapid diagnostic tests (RDTs)». web. archive. org. Archivat des d'el original, el 18 de febrer de 2010. Consultat el 2021-09-16.
  5. ↑ «Malaria RDTs-Home». web. archive. org. Archivat des d'el original, el 20 de febrer de 2010. Consultat el 2021-09-16.
  6. ↑ «Wayback Machine». web. archive. org. Archivat des d'el original, el 23 de juliol de 2009. Consultat el 2021-09-17.
  7. ↑ «PLASMODIUM LACTATE DEHYDROGENASE (PLDH) MALARIA ANTIBODIES ». web. archive. org. Archivat des d'el original, el 30 d'octubre de 2011. Consultat el 2021-09-16.