Lisado amebocitario de Limulus
El lisado amebocitario de Limulus (LAL)[1] és un extracte acuoso de cèlules sanguínees (amebocitos) del carranc ferradura de l'Atlàntic (Limulus polyphemus). El LAL reacciona en el lipopolisacárido (LPS) de l'endotoxina bacteriana, que és un component de la membrana de les bactèries gramnegativas. Esta reacció és la base de la prova de LAL, que s'utilisa àmpliament per a la detecció i quantificació de l'endotoxina bacteriana.
En Àsia, s'utilisa ocasionalment una prova similar de lisado amebocitario de Tachypleus (TAL) basada en els carrancs ferradura locals Tachypleus gigues o Tachypleus tridentatus. L'ensaig de factor C recombinante (rFC) és un substitut de el LAL/TAL basat en una reacció similar. [2]
.jpg)
Antecedents
[editar | editar còdic]L'investigador mèdic nortamericà Fred Bang va informar en 1956 que les bactèries gramnegativas, inclús si estan mortes, faran que la sanc del carranc ferradura es convertixca en una massa semisólida. Més vesprada es va reconéixer que les cèlules sanguínees de l'animal, cèlules mòvils anomenades ameobocitos, contenen grànuls en un factor de coagulació conegut com coagulageno; este es llibera fòra de la cèlula quan es troba en l'endotoxina bacteriana. La coagulació resultant (gelación) es creu que conté infeccions bacterianes en el sistema circulatori semicerrado de l'animal. [3]
L'anàlisis modern del lisado ha dut a la comprensió d'este sistema de cascada, en múltiples enzimes que treballen en seqüència per a produir el gel. El punt d'entrada de la coagulació induïda per endotoxines és el factor C de Limulus. [4]
En 1977, l'Administració d'Aliments i Medicaments dels Estats Units (FDA) va aprovar el LAL per a provar medicaments, productes i dispositius que entren en contacte en la sanc. Abans d'eixa data, s'havia utilisat una prova molt més llenta i costosa en conills per a este propòsit.
Procés d'extracció
[editar | editar còdic]Els carrancs ferradura es recolecten i s'extrau la sanc de la seua pericardi. Alguns carrancs es tornen a l'aigua, mentres que uns atres es venen per a ser menjats o utilisats com a esc. Les empreses que extrauen LAL dels carrancs ferradura varen declarar abans de 2008 que les taxes de mortalitat eren inferiors al 3 %. No obstant, un estudi de 2009 de la Divisió de Peixca Marina de Massachusetts va declarar que estudis anteriors varen trobar una mortalitat del 5 al 15 % per als mascles i una estimació del 29 % per a les femelles. El propi estudi va trobar una mortalitat del 22 % per a les femelles tornades a l'aigua immediatament i del 30 % per a les femelles mantingudes durant la nit per a representar la pràctica comercial.
Les cèlules sanguínees se separen del sèrum per mig de centrifugación i després es coloquen en aigua destilada, lo que fa que s'unflen i exploten ("lisis"). Açò llibera els productes químics de l'interior de la cèlula (el "lisado"), que després es purifica i es liofiliza. Per a provar una mostra per a detectar endotoxines, es mescla en lisado i aigua; les endotoxines estan presents si es produïx coagulació.
Referències
[editar | editar còdic]- ↑ «Lisado de amebocitos de Limulus». Consultat el 2024-1-3.
- ↑ «Endotoxin Testing Manufacturers and Conservation».
- ↑ «Frederik Bang» (en en). JH Bloomberg School of Public Health. Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health.
- ↑ “Biochemical principle of Limulus test for detecting bacterial endotoxins” . Proceedings of the Japan Academy. Series B, Physical and Biological Sciences 83 (4): 110–9. doi:. PMID 24019589. Bibcode: 2007PJAB...83..110I.
- Este artícul conté una traducció derivada de «Lisado amebocitario de Limulus» de Wikipedia en castellà publicada baix la Llicència de documentació lliure de GNU i la Llicència Creative Commons Reconeiximent-CompartirIgual 4.0 Internacional.